vivantechnologies ME2305說(shuō)明書

M-MuLV Reverse Transcriptase {RNase H¯}

M-MuLV逆轉(zhuǎn)錄酶

描述
莫洛尼鼠白血病病毒（M-MuLV）逆轉(zhuǎn)錄酶是RNA依賴性DNA聚合酶。它可以使用RNA或單鏈DNA作為模板合成從引物起始的互補(bǔ)DNA鏈。缺乏RNase H活性增強(qiáng)了長(zhǎng)cDNA的合成，因此推薦該酶用于制備長(zhǎng)cDNA。

濃度
100 - 500u /μl

測(cè)定條件
50mM的Tris-HCl（pH8.3），6毫米的MgCl ₂，10mM的DTT，0.4毫米聚（RA）•（DT）12-18，與0.5mm [ ³ H] dTTP的在50μl的反應(yīng)體積。/μl的

提供
10X緩沖液M-MuLV RT
500mM Tris-HCl（pH8.3,25℃），75mM KCl，3mM MgCl ₂和10mM DTT。儲(chǔ)存在-20?C。

儲(chǔ)存緩沖液
10mM K-磷酸鹽（pH 7.5），0.1mM EDTA，200mM NaCl，7mM 2-巰基乙醇和50％甘油。儲(chǔ)存在-20?C。

熱滅活
70?C10分鐘

單位定義
1u定義為使用Poly（rA）•oligo（dT）在37℃下在10分鐘內(nèi)將1nmol dTTP摻入酸不溶性材料中所需的酶量。

應(yīng)用

• 一鏈cDNA合成。
• DNA標(biāo)記。
• 通過(guò)引物延伸進(jìn)行RNA分析。

質(zhì)量控制
純化無(wú)污染核酸內(nèi)切酶和核酸外切酶。

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